تشخیص ژن Stx1 درشیگلا دیسانتریه جدا شده از نمونه های بالینی در استان مازندران با استفاده ازتکنیک PCR-ELISA

Authors

  • احمدپور, عسکری گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد آیت ا... آملی، آمل، ایران
  • امانی, جعفر مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... (عج)، تهران، ایران
  • تبار ملاحسن, عقیل گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد بابل، بابل، ایران
  • فتاحی, اسماعیل گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد آیت ا... آملی، آمل، ایران
Abstract:

هدف: در میان باکتریهای خانواده آنتروباکتریاسه، شیگلا دیسانتریه بدلیل تولید توکسین پروتئینی تحت عنوان شیگاتوکسین با داشتن فعالیت سیتوتوکسینی و نوروتوکسینی موجب بیماریهایی اسهال، گاستروانتریت و اختلال ا نعقاد داخل عروقی می شود که امروزه به عنوان مهمترین چالش برای سلامتی انسانها مطرح می باشند.  هر چند روشهای کلاسیک ومتداول میکروبیولوژی  برای تشخیص حساس واختصاصی می باشند اما محدودیت های خاص خود را دارند. لذا این مطالعه بمنظور رفع محدودیت ها و شناسایی توکسین  Stx1  در کمترین زمان و میزان در شیگلا دیسا نتریه  با حساسیت و اختصاصیت بالا بوسیله تکنیکPCR-ELISA  انجام شد. مواد وروش ها: توالی Stx1 (bp490)  بعنوان ژن هدف با استفاده از DIG-dUTP نشاندار تکثیر و سپس محصول نشاندار شده کف میکروپلیت الایزا کوت شده و در نهایت با استفاده از آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین کانژوگه شناسایی انجام شد. همچنین حساسیت و اختصاصیت این تکنیک با نمونه های بالینی مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها : حساسیت  تشخیص  باکتری در نمونه  بررسی شده با استفاده از DNA ژنومی pg 56/1 برای شیگلا دیسانتریه تعیین ودر بررسی اختصاصیت این تکنیک بغیر از شیگلا دیسانتریه دیگر گونه های خانواده انتروباکتریاسه جذب قابل قبولی نداشتند . الیزا مربوط بهDNA ژنومی تا رقت 156/0 پیکوگرم ازجذب معنی داری داشت. از 70 نمونه بالینی مورد بررسی 3 نمونه حاوی ژن stx1 با این تکنیک شناسایی شد. نتیجه گیری: کارایی تکنیک PCR-ELISA نشان داد علاوه بر سادگی، سریع بودن و برخورداری از حساسیت واختصاصیت بالا جایگزینی مناسب برای روش  کشت و PCR می باشد و براحتی قابلیت کاربردی شدن در هر آزمایشگاه طبی را دارد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تشخیص ژن stx۱ درشیگلا دیسانتریه جدا شده از نمونه های بالینی در استان مازندران با استفاده ازتکنیک pcr-elisa

هدف: در میان باکتریهای خانواده آنتروباکتریاسه، شیگلا دیسانتریه بدلیل تولید توکسین پروتئینی تحت عنوان شیگاتوکسین با داشتن فعالیت سیتوتوکسینی و نوروتوکسینی موجب بیماریهایی اسهال، گاستروانتریت و اختلال ا نعقاد داخل عروقی می شود که امروزه به عنوان مهمترین چالش برای سلامتی انسانها مطرح می باشند.  هر چند روشهای کلاسیک ومتداول میکروبیولوژی  برای تشخیص حساس واختصاصی می باشند اما محدودیت های خاص خود را ...

full text

تشخیص ژن های Stx با استفاده از Multiplex PCR در نمونه های بالینی

زمینه و اهداف: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش Multiplex PCR استفاده شد. مواد و روش کار: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه...

full text

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

full text

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

full text

تشخیص ژن های stx با استفاده از multiplex pcr در نمونه های بالینی

زمینه و اهداف: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، rflp برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش multiplex pcr استفاده شد. مواد و روش کار: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، rflp برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 10  issue 5

pages  11- 19

publication date 2016-12

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023